Pasi qelizat ne i kultivojmë

fabrika e qelizavejanë të kontaminuara, shumica e tyre janë të vështira për t'u trajtuar.Nëse qelizat e kontaminuara janë të vlefshme dhe të vështira për t'u marrë përsëri, metodat e mëposhtme mund të përdoren për t'i hequr ato.

1. Përdorni antibiotikë

Antibiotikët janë më efektivë në vrasjen e baktereve nëfabrikat e qelizave.Ilaçet e kombinuara janë më efektive se ilaçet e vetme.Mjekimi parandalues ​​është më efektiv se mjekimi pas kontaminimit.Mjekimi parandalues ​​në përgjithësi përdor një antibiotik të dyfishtë (penicilinë 100u/mL plus streptomicinë 100μg/mL).Pas kontaminimit, metoda e pastrimit duhet të jetë 5 deri në 10 herë më e madhe se sasia e zakonshme.Ilaçi duhet të përdoret për 24 deri në 48 orë pas shtimit, dhe më pas të zëvendësohet me rutinën e zakonshme.Lëngu i kulturës.Kjo metodë mund të jetë efektive në fazat e hershme të kontaminimit.Përveç penicilinës dhe streptomicinës, antibiotikët e përdorur mund të përfshijnë edhe gentamicinën, kanamicinën, polimiksinën, tetraciklinën, nistatinën, etj. Zakonisht përdoren 400 deri në 800 μg/mL kanamicinë ose 200 μg/mL tetraciklinë.Mjeti ndërrohet çdo 2 deri në 3 ditë dhe kalon për trajtim për 1 deri në 2 breza.Vitet e fundit, është raportuar se antibiotikët 4-fluoro, 2-hidroksikuinoline (Ciprofloxacin, Cip), derivati ​​Pleu-romutilin (derivati ​​Pleu-romutilin, BM-Cyclin2: BM-1 dhe derivati ​​tetraciklin (BM-2)) efektive në vrasjen e mikoplazmës kur përdoret vetëm ose në kombinim.Këta tre antibiotikë përgatiten të gjithë në solucione të koncentruara 250X në PBS dhe ruhen në -20°C për përdorim të mëvonshëm.Përqendrimi i përdorimit Cip është 10 μg/mL, BM-1 është 10 μg/mL dhe BM-2 është 5 μg/mL.Kur përdorni, fillimisht aspironi mjedisin e kontaminuar të kulturës, shtoni mjedisin e kulturës RPMI1640 që përmban BM-1, më pas aspironi mjedisin e kulturës pas 3 ditësh, shtoni mjedisin e kulturës RPMI1640 që përmban BM-2 dhe kultivoni për 4 ditë, e kështu me radhë për 3 ditë rresht. .raundet, derisa të vërtetohet me mikroskopi ngjyrosëse fluoreshente 33258 se mikoplazma është eliminuar, më pas shtohet mjedisi normal i kulturës për kulturë dhe kalim 3-4 herë.

2. Trajtimi me ngrohje

Inkubimi i kulturës së indeve të kontaminuara në 41°C për 18 orë mund të vrasë mikoplazmën, por ka efekte negative në qeliza.Prandaj, para trajtimit duhet të kryhet një test paraprak për të eksploruar kohën e ngrohjes që mund të vrasë mikoplazmën në masën maksimale dhe të ketë ndikimin më të vogël në qeliza.Kjo metodë ndonjëherë nuk është e besueshme.Nëse trajtohet fillimisht me barna dhe më pas nxehet në 41°C, efekti do të jetë më i mirë.

3. Përdorni serum specifik për mikoplazmën

Kontaminimi i mikoplazmës mund të hiqet me serumin imunitar të mikoplazmës së lepurit 5% (titri i hemaglutinimit 1:320 ose më lart).Për shkak se antitrupi specifik mund të pengojë rritjen e mikoplazmës, ai kthehet negativ 11 ditë pas trajtimit me antiserum dhe mbetet negativ 5 muaj më vonë.është negative.Megjithatë, kjo metodë është më e mundimshme dhe jo aq e përshtatshme dhe ekonomike sa përdorimi i antibiotikëve.

4. Metoda të tjera

Përveç metodave të sipërpërmendura të heqjes së kontaminimit, ekzistojnë edhe metoda të inokulimit dhe sterilizimit te kafshët, metodat e fagocitozës së makrofagëve, metodat e shtimit të bromouracilit tek të kontaminuarit.shishe kulturedhe pastaj rrezatimi i tyre me dritë, dhe metoda filtrimi, etj., por të gjitha janë më të mundimshme dhe joefektive.Prandaj, sapo të ndodhë kontaminimi me mikoplazmë, përveç rasteve kur ka një vlerë veçanërisht të rëndësishme, ai në përgjithësi hidhet dhe rikulturohet.

ju lutemi kontaktoni Whatsapp & Wechat: +86 180 8048 1709